鸡接种cvi988-rispens疫苗后仍发生马立克氏病的原因分析:一、疫苗生产及质量标准关于疫苗的生产质量问题，最重要的是对疫苗本身的免疫效力、安全性和外源病源污染等方面的了解。其决定因素是应认真考虑生产疫苗的毒种是否来源正规，符合标准，以及制苗种毒和疫苗代次的确定是否合理，疫苗效价是否保证等。1.制苗种毒的来源:在中国，1988年首次由北京市农林科学院畜牧兽医研究所独家从荷兰引进该制苗种毒并进行了产业化生产CV1988/Rispens冷冻疫苗，由于该疫苗在国内的大量推广及有良好应用前景，因此，目前一些单位或个人试图通过各种途径从其他国家获得该毒种，但如果这些毒种来源不明或检测背景材料不清楚，疫苗的最终生产质量是一个值得考虑的问题。2.疫苗种毒代次问题:问题的关键在于各厂家确定的一个既能保证毒株的毒力致弱充分，又能保证疫苗免疫原性的产品代次，主要应从CV1988/Rispens疫苗的制苗种毒代次和产品代次这两种代次进行了解和考虑。如果使用较低代次种毒生产的疫苗，可能存在由于种毒或疫苗的代次过低，毒力致弱不充分，通过免疫鸡群的传播而导致病毒毒力返强，最终引发MD，也是值得探讨的一个问题。3.疫苗效价:根据荷兰及国内本研究所的试验资料可以看到，CV1988/Rispens冷冻疫苗的效价(PFU/羽)与疫苗的保护率并不成正比关系。试验研究表明，病毒蚀斑单位含量达到一定程度，保护率不再增加。实验室隔离饲养条件下，100PFU/羽仍可提供SPF鸡一定的保护指数(58.0)，500、1 000、000和4 00O PFU/羽，免疫接种SPF鸡后获得的保护指数(均为79.0)并无显著差异。考虑到现场早期污染及使用时的各种效价损耗，各厂家在疫苗出厂前病毒蚀斑单位均提高数倍以保证最终的疫苗效价在各国标准以上。但接种剂量过大，也会造成免疫麻痹或影响鸡只的生长发育。目前欧洲标准为1 0OO PFU/羽，美国为1 5OO PFU/羽，中国为3 00O PFU/羽。考虑到种毒、生产成本及质量标准不同，各国一些厂家或个人生产的疫苗出厂效价过低是造成目前国内MD免疫失败的原因之一。4.外源病原污染疫苗问题:MD疫苗中污染外源病原，特别是一些免疫抑制性疫病病原﹝如网状内皮组织增生症病毒(REV)、淋巴白血病病毒(ALV)、鸡传染性贫血病病毒（CAV)等﹞，除本身导致发病引起肿瘤外，还可以造成免疫抑制，影响CVI988/Rispens疫苗的免疫应答而出现MD免疫失败。二、疫苗的保存和使用CV1988/Rispens活疫苗是一种细胞结合性病毒，必须在液氮条件下(-196℃)保存、运输。由于有效的疫苗毒存在于活细胞中，活细胞死亡．疫苗中的活病毒也在瞬间死亡。因此，在疫苗保存及使用过程中，要最好地保持细胞的活性，也就要最大限度地保持合格疫苗的出厂效价。1.液氮保存问题:在疫苗保存和运输过程中，一些厂家或鸡场常购买-些劣质液氮罐用于运输和保存疫苗。这些罐特别容易损坏，表现为液氮罐失真空造成液氮挥发加快，由于没有及时发现，部分疫苗暴露在损坏的空罐中时间过长而导致效价降低或完全失效。这些疫苗如果使用，就有可能出现零星散发或普遍发生MD免疫失败的现象，这种情况的鸡群MD现场发病率一般可在30%～50%。这对于一些由冻干疫苗转为液氮疫苗的新用户，出于缺乏液氮保存及检测经验或鸡场技术员工作责任心不强，发生的可能性更大。２．疫苗的使用:使用时，由于融化疫苗的水温、稀释液温度、疫苗稀释后放置时间、注射等操作不按各厂家要求规范进行，也会造成部分疫苗效价降低或失效，引起现场MD。国产CVI988/Rispens冷冻疫苗，在37～38℃速融后，要求使用稀释液的温度必须在25～37℃。如果种鸡场或孵化场在寒冷季节的早上或晚间气温相对较低的时间段内进行操作使用，稀释液温度不按要求提高温度使用，或是沿袭以前使用冻干疫苗的冰箱冷藏保存方法，这样在使用时，疫苗效价会大大降低(如稀释液在15℃下环境中，疫苗效价下降可达35%～55%)。如果再加上随着注射时间的延长，疫苗效价的不断下降，这样现场发生MD的情况就不可避免。此外，由于国内目前许多鸡场为防止雏鸡的细菌早期感染死亡，在l日龄接种CV1988/Rispens疫苗的同时，常在稀释液中加入抗生素或在较短的时间内在注射疫苗的同一部位又注射一针抗菌药物(如恩诺沙星、庆大霉素、青霉索、链霉素等)，这样由于药物对疫苗的不良影响，疫苗病毒的效价也将有所下降，导致MD免疫失败的发生。所以，在选择可以与MD疫苗同时使用的抗生素药物时，应以疫苗生产厂家的试验数据为准，不可轻信药物生产厂家的宣传。在注射操作中，也会由于注射剂量不准确(如仅用0.5羽份最接种)及漏注疫苗而使雏鸡不能产生应有的免疫效力而散发MD，这种情况在不少鸡场都发生过。因此，在注射疫苗过程中，鸡场负责人或技术人员必须检查注射质量，确保每只雏鸡都准确无误地接种0.2毫升疫苗。三、养鸡环境污染严重众所周知，我国一些养鸡户的自身饲养管理水平低下，不仅马立克氏病强毒的早期感染严重，还有其他免疫抑制性疾病(如传染性法氏囊病、球虫病、鸡白痢杆菌病、鸡传染性贫血病、淋巴细胞性白血病等)早期感染，以及其他药物和应激等也同样干扰马立克氏病疫苗的免疫，最终均同样引起MD现场问题。这样的环境和条件下，任何一种好的疫苗都难以发挥其良好的免疫保护效果，现场发生MD、ND、IBD、IB、球虫病等都是不可避免的。随着现场MDV毒力的变异增强，欧洲1996年、美国1999年以后相继发生CVl988/Rispens疫苗免疫接种的鸡群爆发MD的情况，并且分离出特超强毒MDV(vvWDV)。美国自1999年下半年至2O00年上半年内分离的现场毒株几乎全部为特超强病毒。试验证明，CVI988/Rispens疫苗对这些毒株的保护效果不到70%。对于国内复杂的养鸡环境，特别是一些已经使用了多年CVI988／Rispens疫苗的地区或鸡场，是否也存在由于疫苗免疫的作用，导致当地MDV毒力演化增强的情况，从而出现目前或在最近的将来出现出于特超强毒所致的MD免疫失败的可能。四、小结对于MD的防制，目前最有效的措施仍是选择质量合格的、安全有效的CVI988/Rispens 冷冻疫苗，并加以正确保存及操作使用。考虑到现场MDV毒力的变异增强，以及现有疫苗的效力已经达到极限，在较短时间内很难再找到比CVI988/Rispens疫苗效力更好的疫苗毒株来代替其应用于MD的免疫预防。最终的MD防制应依靠疫苗、建立养鸡环境生物安全体系及鸡的抗病育种等方面的一个系统过程来进行。
